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逆轉錄試劑盒(含 DNA 酶)

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產品品牌Biosharp

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更新日期2021-06-22 10:15

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商品信息

基本參數

品牌:

Biosharp

所在地:

浙江 杭州市

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≥1 盒

供貨總量:

1000 盒

有效期至:

長期有效
詳細說明

產品簡介:

本產品是一種高效、穩定、快速并可以去除基因組 DNA 污染的反轉錄系統,5× RTMasterMix 為一管式反轉錄預混 Mix,含有反轉錄所需的多種試劑(HˉRTase、RNaseInhibitor、dNTP Mixture、Buffer),只需加入模板 RNA 引物和水即可進行反應。試劑盒采用的反轉錄酶去除了 RNase H活性,且熱穩定性更強,可耐受 55℃反應,提高復雜RNA模板的反轉錄。MasterMix 中添加了熱敏雙鏈特異性核酸酶,可在反轉錄過程中直接降解去除 RNA樣品中殘留的基因組 DNA(gDNA)污染。Oligo dT & Random Primer 單管提供,如需使用特異性引物,可直接將其替換使用。


產品組成:

組分  100T

5× RT MasterMix  400 μl

20× Oligo dT & Random Primer  100 μl

RNase free H 2 O  2×1 ml

使用方法:

1、將模板 RNA 和試劑在冰上解凍,使用前將每種溶液輕彈或者輕微渦旋振蕩混勻,

簡短離心以收集殘留在管壁的液體到管底。

2、在 RNase free 管中冰上配制以下反應體系:

組分  體積

Total RNA/mRNA  0.1-2 μg

5× RT MasterMix  4 μl

20× Oligo dT & Random Primer 或特異性引物  1 μl

RNase free H2O  補足 20 μl

3、移液器輕輕吹打混勻,放入 PCR儀運行如下程序

快速程序  標準程序

37℃,15~30min  25℃,10min

85℃,5min  55℃,30~60min

85℃,5min

通常可選擇快速程序進行反轉錄反應;如果模板具有復雜二級結構或高 GC 區域,使用標

準程序。

4、得到的 cDNA 產物可立即用于 qPCR 反應,或在-20℃保存,并在半年內使用;長

期存放建議分裝后在-80℃保存。cDNA應避免反復凍融。


注意事項:

1、避免 RNase污染。

2、為保證反轉錄成功建議使用高質量的 RNA 樣品。

3、5×RT MasterMix 非常粘稠,易吸附在管壁和吸頭外導致損失,用前請點甩離心,

并避免吸頭外壁沾附損失。

4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


保存方法:

避免反復凍融,-20 ℃保存 1年。

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